想必大家都有“贴膜”的经历,也就是给96孔PCR板封膜。确保封板膜与96孔板亲密贴合,防止液体蒸发,才能保障实验顺利。今天我们来分享一下,如何正确地封膜。
自粘性封板膜的使用方法和注意事项:(也适用于铝箔膜)
一、将封板膜贴在板子上
从自封袋中取出单张封板膜,然后重新封好自封袋,以保持其中的无酶环境。保持底衬面朝上,握住封板膜,沿着切线处慢慢撕下底衬。然后将封板膜粘性面的一端贴在板子上,掌握好距离和角度,避免后续贴歪。贴的过程中一端贴,另一端拉住。
注意:一定要戴手套。如果使用单端标签的封板膜,则将衬纸部分除去,然后将封板膜锚固到板上,使其密封在整个板上,然后继续除去衬纸。这种方法可以消除封板膜产生的卷曲和回滚。
如果使用两个末端标签的96孔PCR板,请以连续平滑的方式剥离中心衬纸。缓慢剥离内衬可以减少卷曲。不要接触薄膜的粘合表面。
二、压膜
使用压膜板缓慢刮压封板膜,使其全部密封到板上。假如没有专用的压膜板,可以找一个边缘光滑的卡。压膜步骤应至少水平和垂直执行两次。施加足够的力(也别太大力)对于获得良好的密封性至关重要。
将压膜板沿着96孔PCR板的所有外边缘刮压至少两次,确保施加坚定而持续的压力。孔间和边缘要都要压一遍。为了好结果,要耐心图片。将封板膜正确密封到板上之后,沿切线撕下接头部分。
注意:压膜的时候,另一只手要稳住板子,避免板子剧烈晃动。
三、检查
密封后仔细检查平板,确认薄膜与板之间是否紧密贴牢。确认每个孔周围的粘贴痕迹,平板的整个表面(包括周边)都被密封,以及膜上是否有液体。封板膜不应出现褶皱,如果观察到皱纹,则说明板未正确密封。
注意:对于边缘凸起的平板,封板膜在板上定位可能不正确,要避免膜向上延伸到96孔PCR板的侧壁上;在开始PCR实验前之前将密封的平板放置至少10分钟,封板膜的粘合力将随着时间增加。有条件话,使用孔板专用离心机离心。