PCR(聚合酶链式反应)是一项广泛应用于现代生物学研究中的技术,可以在短时间内扩增特定DNA序列。96孔PCR板是其中重要的实验器材之一,下面将介绍在其使用过程中需要注意的事项。
1、预处理
在进行PCR前,首先需要对96孔PCR板进行预处理。因为新制备出来的光滑塑料表面通常不容易与试剂液接触并形成表面张力导致反应效率低下。因此,在使用前我们需要经过去脏、消毒和干燥等步骤。
2、填充
填充样本时,保持操作台整洁严肃;避免交叉污染;同时也需留意分配均匀样品量准确无误以及所选取植物组织是否具有代表性。
3、加盖
加盖后需轻轻压平所有井至水平状态,并检查各井间距是否相等,看上去像个正方形或者长方形而不是歪歪扭扭.
4、温度控制
PCR过程中温度较高,超出了许多试剂/化合物和工具质量可承担的高温范围。因此,在实验过程中,必须要严格控制反应温度,并进行恰当的冷却。
5、反应液体积
在加入反应液时,不要超出PCR板孔口的限制。另外还需注意各孔内反应液量是否均匀,避免空气泡等情况影响扩增效果。
6、重复利用问题
为了更好地节约资源并保障环境安全,实验室能否将96孔PCR板回收再利用?尽管这听起来是一种可行性较高且环保的选择,但是需要确保清晰化学物质残留和消毒处理后再次使用;同时也需确保没有任何污染或误差会对下一轮实验产生干扰影响.
总之,在使用96孔PCR板时,我们必须非常仔细地操作每一个步骤以及精准完成每个试剂药品投料分配比例、时间点所指定任务;这样可以帮助我们避免很多潜在风险和错误从而提供结果!